下列步骤以单管冻存细胞进行培养的实验方案为例。

● 准备一烧杯37°C的水。

● 从液氮储存中取出一管细胞，注意保护手和眼睛。

● 拧松管盖1/4圈，等待10秒钟以释放螺纹中可能残留的液氮，再重新拧紧管盖。

● 将冻存管的下半部分置于37°C水浴中进行解冻，直至冻存管内仅剩余一小块冰芯，使细胞迅速解冻。

● 用消毒液擦拭管体外表面，再将其移至II级A型层流细胞培养通风橱中。

● 打开管盖，使用1 mL移液器上下吹打细胞悬液以分散细胞。

原代细胞对解冻过程非常敏感，因此将小瓶置于37℃水浴中，保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶，并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪，以便可以立即用于接种细胞，并置于培养箱中。