产品属于：

储存条件：
孵育液B1：-20℃保存；其它2-8℃保存。

有效期：
6个月。

产品简介：
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP/AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内。
碱性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。
该染色试剂盒可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色，碱性磷酸酶活性部位呈蓝色。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 显微镜● 4%多聚甲醛● 湿盒● 载玻片

使用注意事项：
● 所有的工作液请使用前新鲜配制，配制后立即使用。
● 水洗后不要太干即放入孵育液中孵育，太干后染色效果会变差。
● 试剂容易失效，开启后立即使用。
● 样本需新鲜，取材后立即处理，否则会影响酶的活性。
● 血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。
● 培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。
● 冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
● ALP孵育液易失效或降低阳性强度，即配即用，不宜久置。
● 复染时，核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。
● 每次染色时，应有阳性对照片。
● 试剂盒中配备的固定液更适用于血液、骨髓涂片的固定，培养细胞/细胞爬片建议用4%多聚甲醛固定，效果更佳。

使用方法：

孵育液配制：
临用前，按B1:B2=1:1比例混合均匀，即为ALP孵育液，现配现用。
(A)涂片/切片
1.血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片入ALP固定液固定3min，水洗。
【注】：
● 梯度入水后的石蜡切片无需固定。
2.滴加配制好的ALP孵育液，放入湿盒中，避光孵育15～20min，水洗。
3.入核固红染色液或甲基绿染色液复染3～5min。
4.水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。
(B)贴壁培养细胞
1.取6孔板或其他容器培养的细胞，弃液,PBS清洗干净（1-2次）。
2.加入4%多聚甲醛固定10～15min,PBS清洗。
【注】：
● 培养细胞/细胞爬片建议用4%多聚甲醛固定，效果更佳，不建议用ALP固定液。
3.滴加配制好的ALP孵育液，放入湿盒中，避光孵育15～20min,PBS清洗。
4.入核固红染色液或甲基绿染色液复染1～3min。
5.PBS清洗、镜检。

结果分析：
ALP活性部位蓝色
细胞核红色(核固红)或绿色(甲基绿)