PAP elisa酶联免疫试剂盒间接法

(1) 抗原包被：用包被液将PEDV抗原作1∶5稀释包被反应板，每孔100μl，同时设阴性细胞培养物对照孔，置4℃过夜。

(2) 洗涤：用洗涤液洗涤2次，每次2min，沥干。

(3) 加入被检血清：用保温液将被检血清作1∶100稀释，加入反应板相邻的两个孔中，每孔100μl。同时作阴、阳性标准血清对照，置37℃孵育1h。

(4) 洗涤3次：方法同上。

(5) 加入酶结合物：用保温液将酶结合物作1∶4 000稀释，加入反应孔中，每孔100μl，置37℃孵育1h。

(6) 洗涤3次：方法同上。

(7) 加入底物：每孔100μl，置室温暗盒内显色20min。

(8) 加入终止液：每孔50μl，静置5min。

(9) 测定OD值：用检测仪，于492nm波长，按仪器使用及制定标准要求调节仪器，测定各反应孔的OD值，记录结果。