猪低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒操作步骤
猪低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
α蛋白激酶3抗体(心肌)
表皮型脂氧合酶3抗体(鱼鳞病相关蛋白)
锚蛋白重复域28抗体
淋巴细胞相关AF4样蛋白抗体
锚蛋白重复结构域蛋白12抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体
锚蛋白重复结构域蛋白9抗体
锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体
脂肪特定转录因子2抗体
载脂蛋白L3抗体
肿瘤/睾丸抗原81抗体
共济失调蛋白7样2抗体
砷酸盐耐药蛋白ARS2抗体
芳香基硫酸酯酶1抗体
砷酸盐转运三磷酸腺苷酶抗体
精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体
共济失调蛋白7样1抗体
孤独症易感基因2蛋白抗体(自闭症相关蛋白1)
脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体
芳香基硫酸酯酶H抗体
溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体
载脂蛋白1抗体
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