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表达感受态细胞

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BL21感受态细胞

商品属性:

产品名称 规格 保存条件 货号
BL21感受态细胞
10×100 μl50×100 μl10 μl
-80℃(6个月)
EY-01G98523


商品详细说明:


BL21是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3)等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如:pGEX,pMAL质粒)。BFB生命科学的BL21感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg DNA。

操作方法:


BL21感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


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