商品属性:
产品名称 | 规格 | 保存条件 | 货号 |
Y1HGold感受态细胞 |
10×100 μl、50×100 μl、10 μl |
-80℃(3个月) |
EY-01G98524 |
商品详细说明:
操作方法:
取pBait-AbAi质粒5 µg,BstBI或 BbsI酶切1小时,回收。
取100 μl冰上融化的Y1HGold感受态细胞,依次加入预冷的线性pBait-AbAi质粒1-5 µg(体积不高于15 µl),Carrier DNA (95-100 ℃5 min,快速冰浴,重复一次) 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。
ddH2O 50 µl重悬,涂SD/-Ura平板,29℃培养72 h。
挑取5-10个克隆,用PCR方法确定pBait-AbAi 整合到Y1HGold 基因组中,PCR 阳性菌株在SD/-Ura平板划线,29℃培养72 h,4℃保存,此菌株即是Y1HGold[Bait/AbAi] 菌株。
注意事项:
地址:上海一研生物科技有限公司
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