商品属性:
产品名称 |
规格 |
保存条件 |
货号 |
R5421感受态细胞 |
10×100 μl/50×100 μl/10 μl/5 ml |
-80℃(3个月) |
EY-01G98586 |
R5421酿酒酵母菌株为K+/钾离子缺陷型菌株,在文献中也称为CY162,MATα型,多用于K+/钾离子转运蛋白的鉴定试验中,也可用于K+/钾离子通道或钠钾离子泵的鉴定试验。Transformation marker为:ura3,leu2,该菌株可以在含有100 mM KCl的培养基中国正常生长,在含有5-10 mM KCl的培养基中生长缓慢,当培养基中KCl浓度低于0.5 mM,R5421(CY162)细胞停止生长。BFB生命科学的R5421感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存三个月,pGADT7质粒检测转化效率>103 cfu/μg DNA。
操作方法:
Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态,步骤如下:Carrier DNA 放95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min,再次放95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min以上。
取100 µl冰上融化的R5421感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒0.5-3 µg,Carrier DNA10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
5000 rpm离心40 s弃上清,ddH2O 400 µl重悬,离心30 s弃上清。
ddH2O 50 µl重悬,涂板,29℃培养48-96 h。
注意事项:
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