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商品属性：
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产品名称 |
规格 |
保存条件 |
货号 |
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JM109(DE3)感受态细胞 |
10×100 μl/50×100 μl/10 μl |
-80℃（6个月） |
EY-01G98607 |
JM109(DE3)菌株来源于JM109，用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于JM109的染色体上，所以称为JM109(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。BFB生命科学的JM109(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu/μg DNA。
操作方法：
JM109(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。
42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
混入质粒时应轻柔操作。
转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2 mM均可）。
为获得需要量的蛋白，******诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
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