商品属性:
产品名称 |
规格 |
保存条件 |
货号 |
NovaBlue(DE3)感受态细胞 |
10×100 μl/50×100 μl/10 μl |
-80℃(6个月) |
EY-01G98608 |
NovaBlue(DE3)来源于K12菌株,具有极高的转化效率,是转化效率最高的原核表达菌株,可同时用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区,使得NovaBlue(DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,广泛用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)菌株具有四环素抗性,endA1和recA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取;lacZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑筛选。BFB生命科学的NovaBlue(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达109 cfu/μg DNA。
操作方法:
NovaBlue(DE3)感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA并用手拨打EP管底混匀,冰中静置25分钟。
42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
混入质粒时应轻柔操作。
转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2 mM均可)。
为获得需要量的蛋白,******诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
地址:上海一研生物科技有限公司
Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.
电话:15021460884
电话:13611928337
电话:021-69985186
电话:021-69985169
网址:www.E-research.com.cn
本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。