产品属于：

储存条件：-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
1．避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。
2．细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3．还原的MTT在460-630均有较好的吸收，如果你的酶标仪是滤光片，可以选470 nm左右或630 nm 左右的滤光片，如果酶标仪有单波长，你可以在检测前扫描一下吸收谱，选用******吸收波长检测，******波长，在550nm附近，必要时加一个参比波长以扣除非特异性吸收。
4．MTT溶液为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。
5．MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
6．Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。

使用方法：
贴壁细胞：
1．收集对数期细胞，每孔加入100μl细胞悬液,使待测细胞调密度约2000-10000孔。
2．5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，也可两小时，或半天时间后加药，一般5-7个梯度,每孔100μl,设3-5个复孔。
3．5% CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
4．每孔加入10μlMTT溶液，继续培养4h。若药物与MTT 能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS 冲2-3 遍后，再加入含MTT的培养液。
5．终止培养，小心吸去孔内培养液。
6．每孔加入150μl溶解液，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶标仪490nm或550nm或570nm 处测量各孔的吸光值。
7．同时设置调零孔(培养基、MTT、溶解液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液)
悬浮细胞：
1．收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度1×106/ml，按次序将补足的无血清培养基40μl、需检测药物10μl、细胞悬液50μl(即5×104细胞/孔)，共100μl 加入到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100μl培养基)。
2．置37℃，5%CO2孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
3．每孔加入10 μl MTT溶液，继续培养4 h。
4．离心(1000 转x10min)，小心吸掉上清，每孔加入100 μl溶解液，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解。490nm或550nm或570nm 处测量各孔的吸光值。
5．同时设置调零孔(培养基、MTT、溶解液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、溶解液)，每组设定3-5复孔。

结果分析：
细胞的存活率：将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取均数±SD。
细胞的存活率以T/C%表示，T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。
细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100