产品属于：

储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
● 正式实验前，建议先做几个孔做预实验。
● 部分药物可能对检测有影响，有影响时需换液后检测，无影响时直接检测。用培养基或PBS 来配制待检测药物，加入中性红试剂，测药物溶液在540 处的吸光度。如果该吸光度与不含药物仅加中性红试剂的培养基或PBS 吸光度差异不大，则可以直接加入中性红，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100μl培养基和20μl中性红进行检测。
● 如果样品为高浑浊度的细胞悬液，或者为了去除其它颜色物质的影响，建议设定690nm作为参比波长，以OD540扣除参比波长的OD值即可。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 96孔培养板
● CO2培养箱 ● 带有540nm滤光片的酶标仪或微量分光光度计
使用注意事项：
●中性红染色液长期存放会产生沉淀。可以直接吸取染色液的上清液使用，也可以使用针头滤器等过滤去除沉淀后继续使用，不会影响使用效果。
● 96孔板在细胞培养过程中会存在蒸发问题。在加入中性红染色液前，如果培养液存在明显的蒸发问题，会影响细胞的生长状态，并严重影响后续的检测结果。

使用方法：
1．把细胞培养在96孔培养板内，每孔加入200μl细胞培养液，设置适当的阴性对照和阳性对照，并给予药物刺激。
2．至待检测时间点，如果培养液中的药物推测不会对后续检测产生干扰，直接加入20μl中性红染色液；如果培养液中的药物可能会对后续检测产生干扰，先用PBS、DPBS或HBSS等适当溶液洗涤1-2次，随后加入200μl细胞培养液，并加入20μl中性红染色液。
3．细胞培养箱内孵育2小时。注：对于细胞密度非常低，细胞代谢速率非常慢的情况，可以把孵育时间延长到3-4个小时。
4．去除含有中性红染色液的细胞培养液，用PBS、DPBS或HBSS等适当溶液洗涤1-2次。
5．加入200μl中性红检测裂解液，室温摇床上裂解10分钟。在摇床上摇动可以促进样品的裂解。
6．测定样品的A540。