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产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒 |
Senescence β-Galactosidase Staining Kit |
>100次 |
EY-01X8827 |
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞通常体积变大,并表达在pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
规格说明:
如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通切片的滴染足够检测100个样品。
注意事项:
β-半乳糖苷酶染色固定液对人体有毒、有腐蚀性,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
X-Gal溶液在-20℃或4℃保存会冻结,室温或37℃水浴2~5分钟并适当摇动即可完全融解。
细胞衰老β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件,不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值,而导致染色失败。
试剂解冻后或使用前如果有沉淀,必须在使用前确保沉淀全部溶解。β-半乳糖苷酶染色液B刚从试剂盒中取出时,管底可能存在少量沉淀,属正常现象,充分混匀或Vortex后,沉淀会全部溶解,并须确保在全部溶解后使用。配制染色工作液时,也可能有少量絮状沉淀出现,震荡混匀后就会完全溶解,且须确保全部溶解后才能使用。
使用96孔板等多孔板进行检测时,如果孵育过夜容易产生所谓的“边缘效应”(edge effect),即多孔板四周的孔由于和外界最直接接触,易受外界环境影响,其中最明显的是四周细胞培养孔的蒸发效应。边缘效应会导致细胞生长不均匀、细胞分布不均一、培养液体积不一致、培养液中相关成分的浓度、pH值不一致。建议采取以下方法避免96孔板等多孔板的边缘效应:避免孵育过长时间,以避免蒸发等带来的边缘效应;弃用边缘孔并在弃用的边缘孔中加入等量的水、PBS或其他适当溶液;在多孔板非孔的凹陷处加入适量的水或其他适当溶液;将整块板放在湿盒中;使用防挥发盖;在实验设计时,实验样品最好进行随机分配,不要将某一组样品固定放在某个位置而引入可能的系统性误差。
需自备PBS或HBSS(Hanks Balanced Salt Solution)。
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